Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基熒光素

產(chǎn)品標(biāo)簽

APF 氨基苯基熒光素；HPF羥苯基熒光素；H₂DCFDA；Reactive oxygen species (ROS)；Hydroxyl radical

羥基（HO•）；CAS NO. 359010-70-1；

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

氨基苯基熒光素（APF）和羥苯基熒光素（HPF）是由T. Nagano開發(fā)的兩種活性氧（Reactive oxygen species, ROS）指示劑，比H₂DCFDA（DCFH-DA, DCFH）具更優(yōu)秀的特異性和穩(wěn)定性。APF和HPF顯示有限的非選擇性反應(yīng)，和相對較高的光誘導(dǎo)氧化抗性。APF和HPF具細(xì)胞膜滲透性，本身無熒光，直到與羥基自由基或過氧亞硝基陰離子反應(yīng)，還能與次氯酸陰離子反應(yīng)，產(chǎn)生強(qiáng)綠色熒光（Ex/Em，~490/515nm），可用熒光顯微鏡、高通量成像儀、熒光酶標(biāo)板或流式細(xì)胞儀檢測。

本品以粉末形式提供，可直接溶于無水DMSO配制成10mM儲存液，常用工作濃度范圍1-10μM，需根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)體系或參考文獻(xiàn)進(jìn)行優(yōu)化。

產(chǎn)品特性

1. CAS NO：359010-70-1
2. 同義名：3'-(p-aminophenyl) fluorescein氨基苯基熒光素
3. 分子式：C₂₆H₁₇NO₅
4. 分子量：423.42
5. 純度：≥95%
6. Ex/Em：490/515nm
7. 溶解性：溶于DMSO（10mM）、DMF（5mM）
8. 化學(xué)結(jié)構(gòu)：

使用方法

以下實(shí)驗(yàn)步驟僅做參考，需根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行調(diào)整。在加入APF工作液之前按需處理細(xì)胞。

1. 將低溫保存的粉末置于室溫回溫至少20min，之后加入適量無水DMSO配置成10-20mM儲存液。按照單次用量分裝，-20ºC避光保存，避免反復(fù)凍融。
2. 根據(jù)具體用量，將DMSO儲存液用HHBS緩沖液或其他生理緩沖液稀釋成1-10μM工作液。
3. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)處理細(xì)胞（比如，RASM細(xì)胞用50-100nM 血管緊張素II處理3-5h）。
4. 取步驟2）準(zhǔn)備的1-10μM工作液加入細(xì)胞，37ºC孵育20-60min。
5. 吸掉染色工作液，用HHBS或其他生理緩沖液替換。
6. 用合適的熒光儀器（Ex/Em=490/515nm）來檢測。

【注1】：BSA和酚紅會(huì)影響熒光，需謹(jǐn)慎使用。

【注2】：APF和HPF能用于溶液體系或胞內(nèi)ROS檢測。

注意事項(xiàng)

1. APF和HPF僅用于科研研究，不可用于體外診斷研究。
2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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fluorescein (APF) 氨基苯基熒光素（羥基自由基熒光探針）

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