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EGY48酵母化學感受態細胞

EGY48酵母化學感受態細胞

簡要描述:

EGY48酵母化學感受態細胞是LexA系統酵母雙雜交用實驗菌株,MATα型,能直接轉化質粒進行蛋白相互作用驗證或雙雜交文庫篩選和構建。轉化標記為ura3,his3,trp1。報告基因為LEU2。EGY48-LexA酵母雙雜交系統需要三種質粒配套使用,分別為pLexA、pB42AD和p8op-LacZ。

產品時間:2024-03-20

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EGY48 Chemically Competent Cell

酵母菌化學感受態細胞

溫馨提示

見我司(懋康生物)整理的酵母雙雜交(Yeast two-hybrid assay產品專題。

產品標簽

LexA雙雜交系統;EGY48Y2HGoldpGBKT7pLexAAureobasidin A AbA);金擔子素;

產品信息

產品名稱

產品編號

規格

價格(元)

EGY48 Chemically Competent Cell

酵母菌化學感受態細胞

MF2358-1000UL

10×100μl

290

MF2358-5000UL

50×100μl

1320

產品包裝

組分編號

組分名稱

保存

貨號(規格)

MF2358-1000UL

MF2358-5000UL

MF2358-A

EGY48 Chemically Competent Cell

-80

10×100μl

50×100μl

MF2358-B

pGBKT7 Control Vector (10ng/μl)

-80

10μl  

10μl  

MF2358-C

Carrier DNA (10μg/μl)

-20

100μl 

500μl 

MF2358-D

PEG/LiAC Solution

+4

5ml

25ml

產品描述

酵母雙雜交系統是用于體內研究蛋白相互作用的一種非常便利的工具,目前采用的有LexA系統和GAL4系統。在LexA系統中,DNA結合域(DNA- BD)由一個完整的原核蛋白LexA構成,轉錄激活域(AD)由一個大腸桿菌來源的含88個氨基酸殘基的酸性肽B42構成),在酵母中能活化基因的轉錄。正常情況,BDAD不會結合,將待檢測的蛋白質分別與BDAD融合,形成誘餌融合蛋白(bait-DNA)和誘捕融合蛋白(prey-DNA),只有當誘餌和誘捕蛋白發生相互作用,促使BDAD的相互接近,才能激活報告基因的轉錄。

EGY48LexA系統酵母雙雜交用實驗菌株,MATα型,能直接轉化質粒進行蛋白相互作用驗證或雙雜交文庫篩選和構建。轉化標記為ura3his3trp1。報告基因為LEU2EGY48-LexA酵母雙雜交系統需要三種質粒配套使用,分別為pLexApB42ADp8op-LacZ。質粒pLexA的篩選標志為HIS3,用于表達誘餌融合蛋白。pB42AD的篩選標志為TRP1,用于表達誘捕融合蛋白。報告質粒p8op-LacZ的篩選標志為URA3,報告基因為LacZ,報告基因UAS來源于LexA op (x6),只有當誘餌(Bait)和誘捕(Prey)相互作用才能啟動LacZ表達。

本品為經特殊工藝制備的EGY48酵母菌化學感受態細胞,用pGBKT7質粒檢測轉化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能穩定保存三個月。

基因型

MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2

注意事項

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

  1. 100 µl冰上融化的EGY48化學感受態細胞,依次加入預冷的目的質粒2-5 µgCarrier DNA 95-100 孵育5 min,快速冰浴。重復一次。)10 µlPEG/LiAc 500µl,用槍吹打幾次充分混勻,30水浴30 min(在15min時翻轉6-8次混勻)。
  2. 之后將管子放42水浴15 min(在7.5min時翻轉6-8次混勻)。
  3. 5000 rpm離心40s棄上清,用400 µl ddH2O重懸沉淀,離心30s棄上清。
  4. 50 µl ddH2O重懸,涂板,放入29培養48-96 h

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

 

EGY48酵母化學感受態細胞

EGY48酵母化學感受態細胞

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